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萌发的大麦种子中存在着两种淀粉酶:α-淀粉酶和β-淀粉酶.α-淀粉酶耐热不耐酸;β-淀粉酶耐酸不耐热,70℃处理15min即变性失活.为测定萌发种子中α-淀粉酶和β-淀粉酶活性的差异,将发
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更新时间:2022-01-27
问题描述:

萌发的大麦种子中存在着两种淀粉酶:α-淀粉酶和β-淀粉酶.α-淀粉酶耐热不耐酸;β-淀粉酶耐酸不耐热,70℃处理15min即变性失活.为测定萌发种子中α-淀粉酶和β-淀粉酶活性的差异,将发芽3天的大麦种子加蒸馏水研磨匀浆、离心取上清液得到淀粉酶提取液,进行如下实验.

操作步骤1号试管2号试管3号试管40℃恒温水浴 10min40℃恒温水浴5min加入试剂X,50~65℃水浴5min,测定砖红色沉淀物的量
加淀粉酶提取液1ml1ml1ml
预处理70℃恒温水浴15min,
取出冰浴中冷却
高温使α-淀粉酶
和β-淀粉酶失活
不处理
加缓冲液2ml2ml2ml
预保温
加40℃预热的
淀粉溶液
2ml2ml2ml
保温
测定
回答下列问题:

(1)步骤⑦中加入的试剂X为___.

(2)上述实验操作步骤中,步骤②中对1号试管进行操作的目的是___;为达成实验目的,设置的1、2、3号试管中,为对照组的一组是___号试管.

(3)通过上述实验,能大致比较萌发3天时种子的α-淀粉酶和β-淀粉酶活性的大小.比较的方法是___.

陆秋回答:
  (1)本实验的目的是测定萌发种子中α-淀粉酶和β-淀粉酶活性的差异,淀粉酶分解淀粉为还原糖,还原糖可以用斐林试剂进行鉴定,步骤⑦中加入的试剂X为斐林试剂.   (2)β-淀粉酶耐酸不耐热,70℃处理15min即变性失活.上述实验操作步骤中,步骤②中对1号试管进行操作的目的是使β-淀粉酶变性失活,测定大麦种子中α-淀粉酶催化效率,为达成实验目的,设置的1、2、3号试管中,为对照组的一组是2号试管(2号试管α-淀粉酶和β-淀粉酶均失活,不能将淀粉变为还原糖,2号和1号对比能测定α-淀粉酶催化效率).   (3)通过上述实验,可以测定各试管沉淀物的量,1、2号试管的差值代表α-淀粉酶的活性,3、1号试管的差值代表β-淀粉酶的活性,差值大的表示该酶的活性大,从而能大致比较萌发3天时种子的α-淀粉酶和β-淀粉酶活性的大小.   故答案为:   (1)斐林试剂   (2)使β-淀粉酶变性失活 2   (3)测定各试管沉淀物的量,1、2号试管的差值代表α-淀粉酶的活性,3、1号试管的差值代表β-淀粉酶的活性,差值大的表示该酶的活性大
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